乙基麦芽酚属于食品添加剂，是一种有芬芳香气的白色晶状粉末。

2.3.2 对照品溶液的制备分别精密称定染料木素和芒柄花素对照品1.90、1.19 mg，加甲醇定容至5 m L，制成对照品贮备液。2.2.9 样品含量测定取鸡血藤粉末1.0 g，精密称定，每批药材平行3份，按2.2.3项下方法制备供试品溶液并进样测定，并计算含量。

2.2.8 加样回收率试验取已知含量的样品粉末6份，每份1.0 g，精密称定，分别精密加入原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素对照品，按2.2.3项下方法制备供试品溶液并测定，计算加样回收率。2.2.6 稳定性试验取样品粉末1.0 g，精密称定，按2.2.3项下方法制备供试品溶液，室温放置，分别于0、2、4、6、8、13、24 h进样测定，结果原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素峰面积的RSD分别为1.52%、1.76%、1.15%，说明样品在24 h内稳定。2.2.5精密度试验精密吸取混合对照品溶液，按2.2.1项下色谱条件重复进样6次，结果原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素峰面积的RSD分别为0.35%、0.45%、1.83%，表明仪器精密度良好。表明染料木素在0.076～2.28g，芒柄花素在0.047 6～1.42g时，峰面积与进样量呈良好的线性关系。分别精密吸取染料木素、芒柄花素对照品贮备液1 m L，定容至5 m L作为混合对照品溶液。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：鸡血藤，对照品，色谱。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品的进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程与相关系数分别为：Y=8109X-192 794,r=0.999 9;Y=6109X-99 356,r=1。通过总氮添加一定量的磷酸甜菜碱，当发酵中后期外界渗透压发生剧烈变化时，细胞吸收的甜菜碱发挥其维持和调节细胞渗透压的特性，能够通过稳定蛋白质结构、提高钾钠泵功能、阻止胞内水分丢失等方式增加细胞对渗透压的抗性。

从而降低了发酵中后期破胞、提高了赖氨酸发酵转换率。原因分析有两点：1) 在于赖氨酸发酵过程有中间放料，随着中间放料菌体及底料营养大量流失，造成OD峰值回降迅速，最终影响产酸及转化率。甲基参与DNA甲基化反应，生产菌的遗传物质DNA经过甲基化修饰，其遗传及表达稳定性提高，有利于赖氨酸发酵过程中菌体产酸能力的保持。从表6中可以看出：该模型p=0.0010.01，说明模型极显著，R2=0.886，R2越接近1，说明模型拟合度良好，方程的显著性及可靠性极高。

在甲基化反应中，甜菜碱-高半胱氨酸甲基转移酶能够催化甜菜碱向高半胱氨酸转移一个甲基，分别生成二甲基甘氨酸和甲硫氨酸，后者为VB12的合成提供甲基。研究结果对降低赖氨酸生产成本、降低氯离子对设备腐蚀有指导意义

通过在赖氨酸发酵底料中添加一定量的磷酸甜菜碱，发酵OD峰值、放罐产酸和转化率(p=00.01)均显著提高，其中OD峰值、放罐酸与磷酸甜菜碱添加量成正相关，而且当添加量由0.5 g/L提高到0.9 g/L时，发酵罐稳定期显著延长(图2)。声明：本文所用图片、文字来源《分析仪器》，版权归原作者所有。随着发酵OD值增高，发酵转化率表现略微下降趋势。2) 磷酸甜菜碱添加量的F=10.62，p=0.000 10.05，说明各区组均数之间有显著差异，即不同磷酸甜菜碱添加量对三级种子OD值影响显著。

2.2 磷酸甜菜碱对赖氨酸发酵的影响发酵罐配方中添加磷酸甜菜碱，质量浓度分别为0，0.3，0.5，0.7，0.9 g/L，每个质量浓度实验3批次，每2 h检测1次OD值，并绘制各质量浓度条件下发酵罐OD曲线如图2所示，同时得出发酵罐配方中添加不同质量浓度磷酸甜菜碱对发酵指标影响的实验结果如表3所示。从表1中可以看出：磷酸甜菜碱添加量0.3 g/L和0.5 g/L时对三级种子OD值影响最显著，当磷酸甜菜碱添加量提高至0.7 g/L和0.9 g/L时对三级种子OD值影响显著性降低。3) 不同培养周期的F=584.97，p=0.000 10.05，说明各处理组均数之间的差异有统计学意义，即三级种子随着培养时间延长OD不断增高。总体看赖氨酸发酵底料中添加磷酸甜菜碱的质量浓度为0.5 g/L时转化率最高71.18%，发酵液中L-赖氨酸质量浓度263 g/L。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：赖氨酸，磷酸，氯化胆碱。通过SAS软件对表1中2～5批次实验数据作随机区组方差分析，结果如下：1) 本例模型(ODij=U+Xi+Yj，X为添加量，Y为培养周期)的F=329.7，p=0.000 10.05，说明模型有统计学意义。

2 结果与分析2.1 磷酸甜菜碱对赖氨酸三级种子活力的影响通过在赖氨酸三级种子配方中添加不同质量浓度的磷酸甜菜碱，培养周期均为12 h， 培养过程中每2 h检测1次OD值，记录得到表1实验数据，根据表1数据绘制图1曲线。综合实验结果及数据分析得出结论：三级种子配方中添加量0.5 g/L磷酸甜菜碱可替代0.5 g/L的氯化胆碱，而且磷酸甜菜碱能显著提高种子活力，缩短成熟周期1.5 h。

成熟周期指种子OD值达到成熟OD值时的种子培养周期，可通过绘制种子OD生长曲线看出，曲线斜率最大(即菌体分裂速率最快)的周期确定为成熟OD值。通过SPSS软件分析表3实验数据，得出结果见表4。通过配对T检验考查添加量0.3 g/L磷酸甜菜碱与添加量0.5 g/L氯化胆碱对三级种子OD值是否有显著差异，分析结果如表2所示，其中p=0.6920.05表示2组数据无显著差异，即可用磷酸甜菜碱替代原配方中的氯化胆碱声明：本文所用图片、文字来源《分析仪器》，版权归原作者所有。通过SAS软件对表1中2～5批次实验数据作随机区组方差分析，结果如下：1) 本例模型(ODij=U+Xi+Yj，X为添加量，Y为培养周期)的F=329.7，p=0.000 10.05，说明模型有统计学意义。通过在赖氨酸发酵底料中添加一定量的磷酸甜菜碱，发酵OD峰值、放罐产酸和转化率(p=00.01)均显著提高，其中OD峰值、放罐酸与磷酸甜菜碱添加量成正相关，而且当添加量由0.5 g/L提高到0.9 g/L时，发酵罐稳定期显著延长(图2)。

从表1中可以看出：磷酸甜菜碱添加量0.3 g/L和0.5 g/L时对三级种子OD值影响最显著，当磷酸甜菜碱添加量提高至0.7 g/L和0.9 g/L时对三级种子OD值影响显著性降低。通过SPSS软件分析表3实验数据，得出结果见表4。

2 结果与分析2.1 磷酸甜菜碱对赖氨酸三级种子活力的影响通过在赖氨酸三级种子配方中添加不同质量浓度的磷酸甜菜碱，培养周期均为12 h， 培养过程中每2 h检测1次OD值，记录得到表1实验数据，根据表1数据绘制图1曲线。综合实验结果及数据分析得出结论：三级种子配方中添加量0.5 g/L磷酸甜菜碱可替代0.5 g/L的氯化胆碱，而且磷酸甜菜碱能显著提高种子活力，缩短成熟周期1.5 h。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：赖氨酸，磷酸，氯化胆碱。随着发酵OD值增高，发酵转化率表现略微下降趋势。

通过配对T检验考查添加量0.3 g/L磷酸甜菜碱与添加量0.5 g/L氯化胆碱对三级种子OD值是否有显著差异，分析结果如表2所示，其中p=0.6920.05表示2组数据无显著差异，即可用磷酸甜菜碱替代原配方中的氯化胆碱。2) 磷酸甜菜碱添加量的F=10.62，p=0.000 10.05，说明各区组均数之间有显著差异，即不同磷酸甜菜碱添加量对三级种子OD值影响显著。总体看赖氨酸发酵底料中添加磷酸甜菜碱的质量浓度为0.5 g/L时转化率最高71.18%，发酵液中L-赖氨酸质量浓度263 g/L。2.2 磷酸甜菜碱对赖氨酸发酵的影响发酵罐配方中添加磷酸甜菜碱，质量浓度分别为0，0.3，0.5，0.7，0.9 g/L，每个质量浓度实验3批次，每2 h检测1次OD值，并绘制各质量浓度条件下发酵罐OD曲线如图2所示，同时得出发酵罐配方中添加不同质量浓度磷酸甜菜碱对发酵指标影响的实验结果如表3所示。

3) 不同培养周期的F=584.97，p=0.000 10.05，说明各处理组均数之间的差异有统计学意义，即三级种子随着培养时间延长OD不断增高。成熟周期指种子OD值达到成熟OD值时的种子培养周期，可通过绘制种子OD生长曲线看出，曲线斜率最大(即菌体分裂速率最快)的周期确定为成熟OD值

赖氨酸发酵糖酸转化率计算公式为糖酸转化率=(产量/加糖量)100%1.4数据统计方法1)采用SAS随机区组分析法分析磷酸甜菜碱对三级种子活力影响。总氮基础配方：MnSO4质量20kg，FeSO4质量20kg，KH2PO4质量250kg，K2HPO4质量250kg，MgSO4质量500kg，消泡油质量100kg，定容体积30m3。

近年来，90%以上的L-赖氨酸产品用于饲料添加剂，各大生产企业相继扩能投产，行业竞争惨烈。刘丽君在L-异亮氨酸产生菌的选育及发酵条件研究中介绍到，通过添加甜菜碱2.5g/L使得苏氨酸发酵周期缩短12h，L-异亮氨酸产量提高66.3%。

步骤3用1支10mL试管，取pH1.3的茚三酮溶液1mL，加入样品离心上清液1mL，再用5支10mL试管，各取PH1.3的茚三酮溶液1mL，分别加入质量浓度为0.2，0.3，0.4，0.5，0.6g/L的赖氨酸盐酸盐标样1mL，摇匀后在沸水浴中加热10min，取出冷却至室温，在以上6支试管中继续各加8mL去离子水，摇匀后用720型分光光度计在475nm波长下检测吸光值。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种伊品生物科技股份有限公司菌种中心提供赖氨酸生产用菌。声明：本文所用图片、文字来源《分析仪器》，版权归原作者所有。中国饲料行业信息网报道，市场上质量分数为21%的氯化胆碱价格逐年上涨，2016年均价5400元/吨，2017年涨至6319.5元/吨，2018年涨至15000元/吨，已经造成赖氨酸发酵成本上升10元/吨理论酸，而磷酸甜菜碱市场价格2016年为9600元/吨、2017年8952元/吨、2018年13500元/吨。

黄登高等在研究乳酸发酵时发现，甜菜碱能够提高高糖浓度下乳酸菌的细胞生长速率和乳酸脱氢酶的活力，进而提高乳酸产量。如何提高赖氨酸发酵糖酸转化率、降低设备腐蚀，是降低生产成本提高企业竞争力的关键点。

统计方法分析结果中的F表示自变量对因变量的影响大小。在现有总氮配方基础上添加磷酸甜菜碱，设计起始流加时间、总氮中磷酸甜菜碱添加浓度、糖氮比(浓糖与总氮的流加体积比)的三因素多水平正交实验，对比转化率得出最佳添加质量浓度、流加起始时间和糖氮体积比。

磷酸甜菜碱是甜菜碱的磷酸盐，在赖氨酸发酵中应用研究较少。步骤2发酵液稀释150～500倍数，用离心机3500r/min离心10min，得到样品上清液。